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抗體的基本概念及用途

來源:菲恩生物   發(fā)布時間:2020-04-13 09:55   點擊量:

1.什么是抗體?
抗體又稱免疫球蛋白,由一種B細胞終末分化成的漿細胞所分泌,是血漿中γ球蛋白的主要構(gòu)成成分,被有機體免疫系統(tǒng)用來鑒別和中和外源物質(zhì),如細菌、病毒等有害微生物或花粉、灰塵等過敏原。這一特性是由其結(jié)構(gòu)特征決定的??贵w整個大分子呈Y型,由2條重鏈和2條輕鏈通過二硫鍵連接而成,每條鏈都包含一個高度保守的恒定域Fc區(qū)和一個可變域Fv區(qū)。抗體Y型結(jié)構(gòu)的兩個分叉頂端都包含一個被稱作抗原互補位(complementarity determining region,CDR)的鎖狀結(jié)構(gòu),該結(jié)構(gòu)在B細胞增殖分化過程中被篩選,每個單獨的漿細胞分泌的抗體該結(jié)構(gòu)只針對一種特定的抗原表位。形象的說,就像一把鑰匙僅能開一把鎖一樣,一種抗體只能和一種抗原相結(jié)合,這種結(jié)合依賴于CDR區(qū)和抗原決定簇的結(jié)構(gòu)互補,靠兩種分子多肽鏈間的氫鍵、范德華力、電荷作用和疏水作用結(jié)合在一起?;谶@一特性,我們利用抗體來標記或者示蹤我們感興趣的目標分子。
抗體結(jié)構(gòu)
2.抗體的用途
隨著生命科學(xué)的發(fā)展和人類基因組計劃的完成,成千上萬的未知蛋白進入人們的視野,圍繞著蛋白展開的研究越來越多,抗體試劑因其結(jié)合特異性和易于標記酶、熒光素的特點在各種實驗中的使用越來越廣泛。幾十年前,科學(xué)家們需要自己獨立完成所需要的抗體的制備,進入上世紀90年代,生物公司開始接手這項業(yè)務(wù),相關(guān)領(lǐng)域的研究飛速發(fā)展,各種成果競相涌現(xiàn)??贵w在免疫性疾病治療和診斷中的應(yīng)用相繼被發(fā)明,由此也衍生出了現(xiàn)代多個抗體相關(guān)行業(yè),包括科研型抗體、治療性抗體藥物以及診斷性抗體試劑等。時至今日,科研抗體仍是目前應(yīng)用最基礎(chǔ)、廣泛的生物活性試劑之一,多種生物學(xué)研究領(lǐng)域隨處可見它的身影,如癌癥研究、心血管研究、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、神經(jīng)科學(xué)、免疫學(xué)研究、表觀遺傳學(xué)等。
 
抗體應(yīng)用 描述
酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA) 不僅能夠?qū)μ囟ǖ牡鞍走M行定量分析,還可以研究分子之間的相互作用或其他特性
蛋白質(zhì)印跡(WB) 確定樣品間蛋白的相對表達水平
免疫組織化學(xué)(IHC) 揭示了樣本內(nèi)抗原的組織特異性和亞細胞定位,在完整組織中對于蛋白表達的分析更有優(yōu)勢
免疫細胞化學(xué)(ICC) 研究蛋白的亞細胞分布
流式細胞術(shù)和細胞分選(FACS) 測量細胞某些化學(xué)和物理特性的一種手段
免疫沉淀(IP) 分離純化單一或復(fù)合蛋白的最常用的一種方式。抗體被固定在固相基質(zhì)(如磁珠/瓊脂糖小球)上,從而從復(fù)雜溶液中捕獲抗原
染色質(zhì)免疫沉淀(ChIP) 用來確定特定蛋白是否與體內(nèi)特定DNA序列相互作用

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